**细胞介绍** HepG2细胞系是一种源自一名15岁阿根廷白人男性肝细胞癌患者的上皮样形态细胞系。该细胞能够分泌多种血浆蛋白，包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。HepG2细胞系由Wistar研究所获得，适合用作转染宿主。其表达的标志物有胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞一般表现为贴壁生长，初期会在培养瓶壁形成小岛状的结构，后期可能出现多层堆积或悬浮状态。由于其强大的贴壁性，HepG2细胞广泛应用于肝细胞功能及病毒模型的研究。

**培养条件与传代** HepG2细胞的培养条件主要包括87% MEM（含NEAA）、10%进口胎牛血清及其他添加剂。细胞生长要求在95%空气和5%二氧化碳的环境中，温度保持在37℃。在传代过程中，当细胞出现脱落时，将培养液转移至无菌离心管中，轻柔处理以收集悬浮细胞。贴壁细胞需用PBS清洗后利用胰酶消化收集，最终以适当密度接种至培养瓶中。建议使用**尊龙凯时**品牌的培养基，以确保细胞生长的最佳性能。

**细胞冻存与复苏** 在细胞密度达到80%以上且活细胞率超过95%时，可进行细胞冻存。将细胞沉淀用4°C冻存液重悬，并适量分装入冻存管中，先在-80℃冷冻过夜，再转移至液氮罐保存。细胞复苏时需迅速解冻并转移至含完全培养基的离心管中进行洗涤，以去除可能的冻存损伤成分。使用**尊龙凯时**提供的优质培养基，能够有效提升细胞存活率。

**常见问题解答** 1. **细胞碎片增多**：细胞内的黑色颗粒常常是细胞外分泌的泡沫或细胞器折光现象，这属于正常现象，不必担心。可通过适当的培养条件减少。 2. **空泡现象**：HepG2细胞中的空泡是正常特性，不影响生长。 3. **细胞生长缓慢**：在适宜条件下，HepG2细胞在传代后2-3天可达到80%汇合率。如生长缓慢可适度增加血清浓度至15%-20%以促进生长。 4. **细胞聚团或不贴壁**：血清品牌和培养基pH是影响HepG2细胞贴壁性的角度，建议使用高质量的低内毒素胎牛血清，以帮助细胞更好地附着于培养基。 5. **漂浮细胞**：在传代或复苏后，如有部分细胞漂浮属于正常现象，随着培养时间的推移，漂浮细胞会逐渐贴壁。 6. **圆形细胞附着**：在培养中遇到的圆形细胞可能正处于分裂阶段，无需特别处理。

**注意事项** HepG2细胞对于培养条件尤其是pH值和血清质量要求较为严格。使用优质的**尊龙凯时**胎牛血清可以有效改善细胞的生长特性。执行细胞培养及传代技术时，可参考相关文献与专业指导，确保操作得当，从而促进细胞健康生长。

**发表过的文献** 截至2024年，研究人员引用了72篇与HepG2细胞相关的文献，涉及许多高影响因子的期刊。以下是一些代表性论文： 1. 《Dienediamine: A Safe Surrogate for the Herbicide Paraquat》 2. 《Photodegradation of Carbon Dots Cause Cytotoxicity》。 3. 《Ubiquitin-Specific Protease 1 Facilitates Hepatocellular Carcinoma Progression》。 4. 《Site-Specific Ubiquitination of VDAC1 Restricts Its Oligomerization》。 5. 《Accumulation of Nanoplastics in Human Cells as Visualized and Quantified by Hyperspectral Imaging》。

以上文献为HepG2细胞研究提供了重要的理论基础，欢迎参考。